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熒光濾光片知識總結

發(fā)布時(shí)間:2013-11-07 09:28:06點(diǎn)擊數:3177次

  物體發(fā)什么顏色的光是因為它吸收了其它顏色的光而反射該顏色的光,如FITC能吸收可見(jiàn)光譜中的藍色光,而發(fā)射黃綠色熒光。熒光的強度遠弱于激發(fā)光,波長(cháng)要長(cháng)于激發(fā)光。

  激發(fā)濾光片的作用是除去波長(cháng)與熒光光譜段相同的那部分激發(fā)光,即激發(fā)光中長(cháng)波段。

  發(fā)射濾光片/接收濾光片:從熒光中除去短波部分激發(fā)光(仍是針對激發(fā)光)。

  所以,熒光設備應是如此工作,激發(fā)光源發(fā)射出激發(fā)光,到達激發(fā)濾光片后被除去與發(fā)射熒光重合部分的長(cháng)波段,然后到達熒光團,發(fā)射長(cháng)波熒光,再到達發(fā)射濾光片,被除去低于此熒光波長(cháng)的短波激發(fā)光,得到波段狹窄的熒光,從而不受強度遠大于熒光本身的激發(fā)光干擾。

  濾光片如標有cut-in 515,則表示515以上的波段能通過(guò),依此類(lèi)推。而透析袋是cut-off 5KDa,表示5000以上分子量不能通過(guò)。

  但濾光片并不能精確截止某個(gè)波段的光,而只是一個(gè)正態(tài)分布高斯峰的最高點(diǎn)。

  截止型濾光片:通過(guò)長(cháng)于某個(gè)特定波長(cháng)的濾光片,如只能通過(guò)大于700nm的激發(fā)光。

  帶通型濾光片:通過(guò)某個(gè)特定波長(cháng)范圍內的濾光片,如700-800nm。

 

 

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